產(chǎn)品特點

? 安全無毒：GS-GelRed的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內(nèi)； 

? 靈敏度高：適用于各種分子量DNA電泳，對于微量的DNA具有更高的檢測靈敏度；

? 信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低；

? 適用范圍廣：膠染法（電泳前染色）和泡染法（電泳后染色）均可；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可用于dsDNA、ssDNA和RNA染色。

產(chǎn)品簡介

GS-GelRed 核酸凝膠染料（10,000×）是一種安全、靈敏、穩(wěn)定的熒光核酸凝膠染色試劑，適用于瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠上的dsDNA、ssDNA和RNA染色，經(jīng)過本產(chǎn)品染色的DNA條帶在紫外光投射下呈現(xiàn)紅色熒光，可以替代溴化乙錠（EtBr）。艾姆斯氏試驗結(jié)果也表明，該染料的誘變性遠遠小于溴化乙錠（EtBr），使用更加安全。

GS-GelRed和EB具有相同的光譜特性，不需要更換成像系統(tǒng)，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在300 nm紫外光附近可得到最佳激發(fā)。注意GS-GelRed不能被488 nm氬離子激光器（如藍光透射儀）或相似波長的可見光wan全激發(fā)，因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。

適用范圍 

適用于瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠上的 dsDNA、ssDNA 和 RNA 染色。 

注意事項 

1. 染料無需低溫冷藏，請于室溫下避光儲存，避免沉淀。若出現(xiàn)沉淀，請將染料置于 45~50℃  2 min，振蕩使充分溶解后再使用； 

2. 由于 GS-GelRed 的高靈敏性，建議減少 DNA 樣品上樣量，推薦已知濃度樣品的上樣量為50~200 ng/泳道； 

3. 聚丙烯酰胺凝膠電泳請使用泡染法。

使用方法 

一、膠染法（電泳前染色，用法同 EB） 

1. 配制合適濃度的瓊脂糖凝膠； 

2. 用微波爐加熱使瓊脂糖wan全融化； 

3. 加入 GS-GelRed 使其終濃度為 1× （即 100 mL 凝膠中加入 10 μL GS-GelRed 10,000×水溶液），此時溶液呈淡粉色；

 4. 將含有 1×GS-GelRed 染液的瓊脂糖溶液倒入膠槽中，插入齒梳，室溫凝固； 

5. 按照常規(guī)方法進行電泳； 

6. 用 302 nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。 

二．泡染法 （電泳后染色） 

1. 按照常規(guī)方法進行電泳； 

2. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀釋 GS-GelRed 染液至 3×染色液（例如將 15 μL GS-GelRed 10,000×水溶液加入 50 mL 0.1 M NaCl 溶液中）； 

3. 將凝膠小心地放入合適的容器中，緩慢加入足量的 3×染色液浸沒凝膠，室溫搖床孵育 30 min（對于含 3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝膠，需孵育 30 min~1 h，時間隨著丙烯酰胺含量增加而延長。單次使用的 3×染色液可重復(fù)使用 3 次左右，室溫避光保存）； 

4. 用 302 nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。 

GS-GelRed 核酸凝膠染料（10,000×）常見問題與解決辦法 

Q1：使用膠染法，出現(xiàn) DNA 條帶彌散、拖尾或彎曲等現(xiàn)象？ 

A1： 

1) 確保使用的染料終濃度為 1×； 

2) DNA 上樣量過多。將 DNA 樣品上樣量減少至 1/3 或 1/5； 

3) 凝膠濃度不合適。檢測大片段 DNA 建議使用低濃度瓊脂糖凝膠； 

4) 樣品中 loading buffer 過量。loading buffer 中的 SDS 可能會影響電泳效果，建議減少 loadingbuffer 用量； 

5) 使用合適的電壓，建議 5~10 V/cm； 

6) 使用新鮮的電泳緩沖液。 

Q2：使用膠染法發(fā)現(xiàn) DNA 遷移率存在差異？ 

A2： 

1) 將 DNA 樣品上樣量減少至 1/3 或 1/5； 

2) GS-GelRed 分子量較大，大分子量導(dǎo)致 DNA 的遷移速率可能受到染料與 DNA 比率的影響。因此不建議將 GS-GelRed 直接添加到 loading buffer 中使用，這會導(dǎo)致條帶遷移不準(zhǔn)確； 

3) 可使用泡染法準(zhǔn)確確定 DNA 條帶大小。 

Q3：ssDNA 和 RNA 染色效果不如 dsDNA？ 

A3：GS-GelRed 對于 dsDNA 的靈敏度是 ssDNA 或 RNA 的 5 倍，可適當(dāng)提高 ssDNA 或 RNA 上樣量。