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移液器是日常實(shí)驗(yàn)中非常常見的儀器之一,其主要部件如下圖所示大同小異。正確使用移液器不僅可延長(zhǎng)移液器的使用壽命,也可保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,減少實(shí)驗(yàn)誤差。目前市面上比較常見的移液器品牌主要就是德國(guó)Eppendorf移液器,接下來就和大家分享移液器的使用方法及使用技巧供初學(xué)者參考,讓你一文讀懂Eppendorf移液器的使用技巧。
使用前:
1.熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程,選擇適宜量程的移液器。常見的量程包括0.5-5ml、100 -1000μl、20-200μl、10-100μl、2-20μl、0.5-10μl及0.1-2.5μl,各品牌的量程大同小異,量程通常在移液器上都會(huì)標(biāo)注,量程范圍內(nèi)可進(jìn)行大小調(diào)節(jié)。
2.移液器槍頭大小和移液器匹配。常見普通槍頭有大、中、小三種,如圖2所示,分別適配100 -1000μl、20-200μl及10-100μl、2-20μl及以下量程。
3.部分實(shí)驗(yàn)要求槍頭無菌,在實(shí)驗(yàn)開始前需先對(duì)槍頭進(jìn)行高壓滅菌;部分實(shí)驗(yàn)要求無RNA酶,則需直接購買無RNA酶槍頭。
使用中:
1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適量程的移液器及適配的槍頭后,垂直握槍,移液器末端進(jìn)入槍頭后稍微用力,使槍頭較為穩(wěn)固停留在移液器上。
2.吸液體時(shí),采用“慢吸快打"的方式,保持移液器和所吸試劑垂直,按一級(jí)檔吸取所需試劑,吸樣時(shí)速度要慢,避免倒吸;打出樣品時(shí),槍要按到底,動(dòng)作迅速,避免在槍頭內(nèi)有過多殘留。
3.槍頭用完后及時(shí)打掉;吸不同試劑需更換新的槍頭,避免混淆造成污染。
使用后:
使用完后,將槍頭調(diào)回最大量程,注意這里所說的最大量程是在量程范圍內(nèi)的最大值,如20-200μl的移液器用完后調(diào)至200μl即可,放置到原位。
以上即為移液器較為常規(guī)的使用方法,接下來還有一些使用小tips:
①選擇移液器時(shí),一般保持“量的最小化"原則,如所取試劑為15μl,那我們可以選擇2-20μl量程而不是10-100μl量程的移液器,可以大程度減少每次取樣的體積差異。
②吸某些有機(jī)試劑如異丙醇、氯仿等時(shí),除了緩慢吸樣外,可先吸1-2次潤(rùn)洗槍頭,再進(jìn)行最后的吸樣,可保證體積的準(zhǔn)確性。
③吸取粘性試劑時(shí),可將槍頭最末端部分減去,同時(shí)按到第二檔吸樣,可較為容易的吸到粘性液體。
④若有相應(yīng)條件,實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇準(zhǔn)確性高的移液器品牌,尤其對(duì)于0.1-2.5μl這種非常小體積的樣品來說。
關(guān)于Eppendorf移液器的使用技巧,你學(xué)廢了嗎?